Che cosa è un anticorpo biotina?

Contrariamente a quanto si potrebbe pensare prima, un anticorpo biotina non è una sostanza che viene sollevata contro biotina. Piuttosto, un anticorpo biotina è un anticorpo che è stato coniugato con biotina. Biotina si lega fortemente ad un ligando - avidina - che può, a sua volta, essere coniugato a molecole luce rilevabile come fluorofori. Biotina e avidina forma uno dei più forti biologicamente rilevanti legami covalenti sono noti, rendendo le unità ligando / recettore biotin- e avidina coniugati particolarmente utile negli studi scientifici.

La biotina è una vitamina del complesso B - vitamina B7. È una piccola molecola tale che più molecole di biotina possono essere coniugati ad un singolo anticorpo monoclonale o policlonale. Il fatto che la biotina è anche solubile in acqua consente una maggiore versatilità di sistemi tampone che se fosse insolubile. Per una maggiore specificità, coniugazione monoclonale anticorpi di biotina è spesso raccomandata su policlonale coniugazione di anticorpi. La molecola di biotina può essere legato direttamente con l'anticorpo di interesse, oppure può essere collegato tramite una coda molecolare per consentire una maggiore libertà di movimento.

L'avidina biotina ligando si trova in albumina d'uovo. Può essere a buon mercato fatto e facilmente isolato. Molteplici molecole avidina si legheranno ogni recettore biotina, amplificando un unico segnale di rilevamento di anticorpi. Quando un anticorpo biotina aderisce ad un antigene di interesse, uno sperimentatore può esporre il complesso avidina coniugata con fluorofori, rendendo il complesso rilevabile. Attraverso l'imaging fluorescente, l'anticorpo biotina e avidina-coniugato ligando possono essere rilevati con la microscopia ottica, e gli antigeni di interesse possono essere studiate in situ.

Anche se la creazione e l'utilizzo di un anticorpo biotina e una fluorescente tagged molecola di avidina è una soluzione comune per il rilevamento dell'antigene, le alternative esistono che ancora fanno uso del complesso biotina / avidina. Binding biotina ad un ligando come una neurotossina può essere vantaggioso nel rilevare il posizionamento di recettori neuronali colpite dalla neurotossina in questione. È anche possibile coniugare biotina ad una sequenza nucleotidica come acido ribonucleico messaggero (mRNA) per trovare dove queste sequenze nucleotidiche vengono tradotti in proteine ​​o per rilevare regolamentazione mRNA cellulare.

È possibile acquistare anticorpi policlonali o monoclonali biotinilati, se la produzione di anticorpi biotinilati è all'interno della capacità di molti sperimentatori. I protocolli sono disponibili online suggerendo metodi anticorpo biotinilazione, anche se i protocolli più facilmente seguiti collegano direttamente biotina ad un anticorpo, piuttosto che suggerire come intercalare un distanziatore molecolare. Distanziatori molecolari tra biotina e il suo anticorpo associato consentono una maggiore spaziatura esporre più molecole di siti di legame, e questi anticorpi biotina solitamente sono acquistati piuttosto che fatti.

  • La biotina si trova in alcuni alimenti, come gli spinaci.